具有兩對(或更多對)相對性狀的親本進行雜交,在F1產生配子時,在等位基因分離的同時,非同源染色體上的非等位基因表現為自由組合,這就是自由組合規律的實質，也就是說,一對等位基因與另一對等位基因的分離與組合互不干擾,各自獨立地分配到配子中。

自由組合定律的內容

基因的自由組合定律，或稱基因的獨立分配定律，是遺傳學的三大定律之一(另外兩個是基因的分離定律和基因的連鎖和交換定律)。它由奧地利遺傳學家孟德爾(G.J.Mendel，1822-1884)經豌豆雜交試驗發現。同源染色體相同位置上決定相對性狀的基因在形成配子時等位基因分離，非等位基因自由組合。

孟德爾在做兩對相對性狀的雜交實驗時發現，基因分離比為9:3:3:1。圖中黃色圓粒:綠色圓粒:黃色皺粒:綠色皺粒=9:3:3:1這一結果表明，它是由兩對基因分別由基因的分離定律獨自分離的比例3:1產生的。 在真核生物中，自由組合在減數分裂的第一次分裂后期發生。